**产品名称**：猪伪狂犬病毒gE蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒

**英文名**：Blocking ELISA Kit For Detection Pseudorabies Virus gE Antibody

**包装规格**：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

**预期用途**：伪狂犬病，也称为奥耶斯基氏病，是由伪狂犬病毒（PRV）引起的一种急性传染病，常见于家畜和多种野生动物，以发热、奇痒及呼吸和神经系统疾病为主要特征。用于免疫预防的疫苗为gE基因缺失疫苗，监测gE蛋白抗体可有效判断野毒感染。本试剂盒专门用于检测猪血清中的抗伪狂犬病毒gE蛋白抗体，有助于区分感染了野毒的猪和接种了gE基因缺失疫苗的猪。

**试剂盒组成**：

• 酶标记物：11ml×1(红盖) / 11ml×2(红盖) / 26ml×2(红盖)
• 样品稀释液：25ml×1(黄盖) / 50ml×1(黄盖) / 125ml×1(透明)
• 浓缩洗涤液：40ml×1(白盖) / 40ml×1(白盖) / 200ml×1(透明)
• 底物显色液：10ml×1(黑盖) / 10ml×2(棕盖) / 25ml×2(黑盖)
• 终止液：5ml×1(黄盖) / 10ml×1(黄盖) / 25ml×1(黄盖)
• 阳性对照：10ml×1(绿盖) / 15ml×1(红盖) / 20ml×1(红盖)
• 阴性对照：10ml×1(绿盖) / 15ml×1(绿盖) / 20ml×1(绿盖)
• 酶标板：96T×1 / 96T×2 / 96T×5
• 盖板膜：125
• 自封袋：112
• 说明书：111
• 稀释板：125

**储存及有效期**：本产品需储存于2～8℃的环境中，有效期为12个月。打开的包被板需在2～8℃避光保存，避免潮湿，使用期限为2个月。

**适用仪器**：请使用含630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备以及可调微量移液器。

**样品准备**：

1. 取动物全血，使用4000r/min离心10分钟，收集清亮且无溶血的血清；或待血液自然凝固后收集血清。
2. 待检血清使用样品稀释液以1:1比例稀释（例如100μl血清加入100μl稀释液中混匀），阴、阳性对照不需稀释。
3. 浓缩洗涤液使用前需恢复至室温，然后用蒸馏水或去离子水稀释至工作洗涤液（19份水加1份洗涤液），如发现结晶，请加热溶解后再使用。

**检验方法**：

1. 使用前将试剂盒放置室温30分钟。
2. 取适量酶标板条，设定阴性、阳性对照各两孔，其余未用的板条应快速密封并储存在2～8℃。
3. 在阴、阳性对照孔分别加入100μl对应对照；样品孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀后盖好盖板膜，放在37℃避光条件下反应1小时。
5. 甩去孔内液体，每孔添加300μl工作洗涤液，洗涤五次，最后一次拍干。
6. 每孔添加酶标记物100μl，盖好膜，置于37℃避光反应20分钟。
7. 按照步骤5进行洗涤。
8. 每孔加入底物显色液100μl，置于室温避光反应10分钟。
9. 每孔加入终止液50μl，混匀后于10分钟内在630nm测定各孔的吸光值。

**参考值**：在正常实验情况下，阴性对照的平均OD值应≥0.6，阳性对照的平均OD值应≤0.5。

**检验结果的判定**：

• 若样品孔OD值S与阴性对照值N的比值S/N≤0.6，判定为阳性；0.6＜S/N≤0.7，判定为可疑；S/N＞0.7，判为阴性。
• 阳性结果表明该猪可能受到了野毒感染，或者接种的疫苗并非gE基因缺失疫苗。

**试验方法的局限性**：本检测结果仅供筛查，不可作为确诊依据。

**注意事项**：

• 实验过程中需佩戴手套和工作衣，严格执行消毒隔离制度，所有实验废弃物需按传染物处理。
• 应避免终止液接触皮肤或衣物，若不慎接触，请立即用大量自来水冲洗。
• 若试剂盒阳阳性对照和酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。
• 酶标板需在室温下开袋，未用的板条应存放于干燥剂的密封袋中。
• 浓缩洗涤液在低温下易结晶，使用前需恢复至室温。
• 洗涤时各孔应加满液体，避免游离酶未洗净。
• 检测样品应保持新鲜。
• 结果判定以酶标仪读数为准。
• 不同批号的试剂应避免混用。

在使用本试剂盒的过程中，选择人生就是博-尊龙凯时带来的专业产品，将有助于提高测试的准确性与有效性。