念珠菌显色培养基的用途与应用
念珠菌显色培养基主要用于白色念珠菌的分离与鉴定。该培养基采用酶底物法,通过显色反应来区分不同种类的念珠菌。经过在25-28℃培养48小时后,白色念珠菌会显现出蓝绿色,而热带念珠菌则呈现蓝灰色或铁蓝色,光滑念珠菌显紫色,克柔假丝酵母呈粉色,其它念珠菌则显示为白色。细菌生长受到抑制,确保了实验结果的准确性。请注意,此培养基仅供实验室使用。
培养基的制备方法
制备念珠菌显色培养基时,需称取96克的培养基(可根据需要按48g/100ml的比例调整)并加入200ml蒸馏水或纯化水中。在加热过程中,应不断搅拌以确保溶解,且煮沸时间不得超过1分钟。待培养基降温至45-50℃时,轻轻摇匀后倒入无菌平皿中(9cm直径的10ml/皿或7cm直径的15ml/皿),待琼脂完全凝固后,在36℃±1℃的培养箱中倒置放置0.5-1小时备用。
注意事项与贮存
制备好的培养基表面需保持干燥,建议在37℃的培养箱中倒置放置1-2小时。制备好的平板应尽快使用,避免直接光照。干粉培养基需存放在阴暗干燥处,适宜的保存温度为2-8℃,并注意避光保存。若干燥培养基超过保质期、出现结块或颜色变化,则不得使用。
操作步骤
1. 根据国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;2. 将样品液涂布或划线接种于平板;
3. 在25-28℃下培养48小时,观察结果:白色念珠菌呈蓝绿色,热带念珠菌为蓝灰色或铁蓝色,光滑念珠菌为紫色,克柔假丝酵母为粉色,其它念珠菌为白色,细菌则被抑制。
4. 对可疑的白色念珠菌菌落可划线接种到PDA琼脂平板上,在25-28℃下培养24-48小时,然后挑选单菌落进行显微镜检查和生化实验。
质量控制与方法局限性
1. 质量控制方面,干燥培养基应呈均匀且良好的流动性,外观为乳白色。而制备好的平板应为透明无色的固体培养基。2. 宏观微生物试验需要在25-30℃下培养48小时。
3. 方法的局限性在于,此培养基在鉴定白色念珠菌时,偶尔可能出现假阳性或假阴性结果,需进行额外的补充试验以确保准确性。