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猪瘟病毒抗体检测试剂盒使用手册 - 人生就是博-尊龙凯时 版

发布时间:2025-03-14   信息来源:东方珊龙

人生就是博-尊龙凯时推出的猪瘟病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)采用了先进的技术,旨在帮助兽医和科研人员有效检测猪血清中的猪瘟病毒抗体,评估免疫效果。本文将详细介绍该产品的使用说明、原理、组成、储存条件及操作步骤。

猪瘟病毒抗体检测试剂盒使用手册 - 人生就是博-尊龙凯时 版

产品信息

产品名称:猪瘟病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)
包装规格:96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)是一种对猪具有高度传染性、出血性及致死性的疾病。这种传染病通过高热、微血管壁变性引起广泛的出血、坏死及梗塞等症状。本试剂盒能够检测猪血清中的猪瘟病毒抗体,从而用于疫苗免疫效果的评估。

原理

该试剂盒利用酶联免疫法(ELISA)原理,通过与预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板进行反应,检测猪血清和血浆样本中的抗体。样本中若含有猪瘟病毒抗体,将与酶标板上的抗原结合,经过洗涤后再加入酶标记物,形成特异性结合;通过反应生成的颜色深浅来分析样本中的抗体含量。

试剂盒组成

试剂盒包括:预包被的酶标板、酶标记物及其他配套试剂。

储存及有效期

请将试剂盒储存于2~8℃,有效期为12个月。开封后的包被板需避光保存,避免受潮,使用期限为2个月。

适用仪器

该试剂盒需配备450nm、630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备及可调微量移液器。

样品准备

1. 按常规方法制备清亮、无溶血的动物全血血清,样品可在2~8℃保存一周,长期保存需置于-20℃。
2. 将待检血清使用样品稀释液按40倍稀释(如5μl血清加入195μl稀释液),阴、阳性对照无需稀释。
3. 使用前将浓缩洗涤液恢复至室温并稀释20倍作为工作洗涤液。

检验方法

1. 使用前将试剂盒在室温下放置30分钟。
2. 取所需酶标板条,设定阴性和阳性对照孔各2孔,未使用的板条应密封保存。
3. 将阴、阳性对照各100μl加入相应孔,样品孔加入100μl稀释后的样品。
4. 混匀后,盖上盖板膜,在37℃避光反应30分钟。
5. 洗涤孔内液体后,每孔加入350μl工作洗涤液,静置30秒,重复洗涤5次,最后一次应拍干。
6. 每孔加入100μl酶标记物,盖好盖板膜,在37℃避光反应30分钟。
7. 进行最后一次洗涤,步骤同5。
8. 每孔依次加入底物液A、B各50μl,混匀。在37℃避光反应10分钟。
9. 加入50μl终止液,混匀,并在450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔的吸光值。

参考值与结果判定

在正常实验条件下,阴性对照的平均OD值应≤0.3,阳性对照的平均OD值应≥0.6。依据样品的OD值计算SP值,结果判定如下:
- SP值≥0.2,结果为阳性;
- SP值<0.2,结果为阴性。
若实验结果为阴性,表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。

注意事项

1. 实验操作需戴手套,穿工作衣,确保严格消毒和隔离制度。
2. 终止液具有腐蚀性,避免接触皮肤。
3. 酶标板从冷藏环境中取出后需恢复至室温,未用完的应放入干燥剂的密封袋中保存。
4. 浓缩洗涤液在低温下易结晶,使用前需恢复室温。
5. 洗涤时应确保孔内液体充满,以确保游离酶被清洗干净。
6. 检测样品应保持新鲜。
7. 结果判定须以酶标仪读数为准。
8. 不同批号的试剂不得混用。

人生就是博-尊龙凯时致力于为生物医疗领域提供优质的检测产品,确保每一次检测的准确性和可靠性。